Наиболее точным методом определения групповой принадлежности образцов крови по системе AB0 является типирование перекрестным методом. Перекрёстный метод определения группы https://sangvitest.ru/perekrestnyj-metod-opredeleniya-gruppy-krovi/ крови выявляет такие редкие подгруппы группы A, как A2 и A2B (красные кровяные клетки которых несут слабую форму антигена A) и особую группу крови – «бомбейский фенотип», имеющую эритроцитарные антигены H/h.
Как правило, проверочное типирование группы крови доноров и реципиентов выполняется перекрестным методом. Для проведения этого исследования нужны растворы моноклональных диагностикумов цоликлонов: (Анти-A, Анти-B и анти AB) и стандартных эритроцитов трех типов: 0(I), A(II), B(III). Кроме этого, необходимы шесть стеклянных палочек, шесть пипеток Пастера, планшет для исследований крови, песочные часы на 5 минут.
Исследование проводится с обязательным использованием средств индивидуальной защиты — таких как стерильные медицинские перчатки, очки, халат -, поскольку все образцы крови должны считаться патогенно опасными, и при любых манипуляциях с ними следует быть предельно осторожным.
Алгоритм проведения типирования выглядит следующим образом:
- на планшет наносится маркировка, которая содержит ФИО человека, у которого отобран образец крови, дата отбора и дата проведения исследования, для доноров — номер донора из базы донорства, если известен;
- образцу крови дают отстояться в пробирке (30 минут при комнатной температуре) для разделения на эритроциты и сыворотку, после разделения сыворотку следует перенести пипеткой в другую пробирку;
- на планшете размечаются шесть позиций — по три в два ряда;
- в первый ряд на планшете наносятся три маленькие капли цоликлонов в последовательности анти-A, анти-B, анти-AB;
- во второй ряд на планшет наносятся три большие капли растворов стандартных эритроцитов в последовательности 0, A, B;
- рядом с каплями растворов цоликлонов помещаются три капли исследуемых эритроцитов;
- рядом с каплями растворов стандартных эритроцитов помещаются три капли исследуемой сыворотки;
- капли цоликлонов и исследуемых эритроцитов, а также стандартных эритроцитов и исследуемой сыворотки попарно перемешиваются стеклянными палочками, для каждой пары всегда берется новая чистая палочка;
- наблюдение за перемешенными каплями производится в течение 5 минут (по песочным часам), при этом планшет следует слегка покачивать в двух плоскостях.
Правила интерпретации результатов исследования следующие:
- если образец исследуемой крови принадлежит группе AB(IV), то агглютинация (слипание эритроцитов в хлопья или глобулы) должна произойти со всеми цоликлонами, а со всеми стандартными эритроцитами агглютинации наблюдаться не должно. При получении данного результата необходимо провести отрицательный контроль для исключения неспецифичной агглютинации. Для этого исследуемые эритроциты смешиваются с физраствором, полученная смесь должна оставаться однородной;
- если образец исследуемой крови принадлежит группе B(III), то исследуемые эритроциты должны агглютинировать с цоликлонами анти-B и анти-AB, а исследуемая сыворотка — со стандартными эритроцитами группы A;
- если образец исследуемой крови принадлежит группе A(II), то исследуемые эритроциты должны агглютинировать с цоликлонами анти-A и анти-AB, а исследуемая сыворотка — со стандартными эритроцитами группы B;
- если образец исследуемой крови принадлежит группе 0(I), то агглютинация отсутствует со всеми цоликлонами, а сыворотка агглютинирует со стандартными эритроцитами групп A и B.
В исключительно редких случаях исследуемая сыворотка может дать агглютинацию с стандартными эритроцитами всех трех групп (0, A, B). Это возможно, если исследуемая кровь принадлежит группе hh. Такая кровь направляется в специализированную лабораторию для гематологических исследований для подтверждения групповой принадлежности.
Загрузка...
